無菌技術是一套常規措施,旨在防止培養物,無菌培養基儲備和其他溶液受到有害微生物(即敗血癥)的污染。無菌技術控制了來自環境的微生物對培養物的污染或被所處理的微生物對環境的污染的機會。由于生物學家的目標是在不引入外來生物的情況下培養微生物或真核細胞,因此無菌技術對于準確而有意義的實驗至關重要。
無菌技術是在醫療護理操作過程中,保持無菌物品、無菌區域不被污染、防止病原微生物入侵人體的一系列操作技術。無菌技術作為預防醫院感染的一項重要而基礎的技術,醫護人員必須正確熟練地掌握,在技術操作中嚴守操作規程,以確保病人安全,防止醫源性感染的發生。
人們應該永遠記住,不存在完全無菌的工作環境。但是,有許多簡單的常識程序可以減少培養物污染的風險。盡管有時將這種行為稱為“無菌技術”,但該術語僅在防止將任何生物引入實驗室或醫療設備和試劑(例如在手術過程中)時才是適當的。
無菌操作技術主要包括兩方面:
1)創造無菌的培養環境。包括提供密閉的培養容器、培養容器的滅菌、培養基的滅菌等;
2)在操作和培養過程中防止一切其它微生物的侵入的措施。包括紫外線殺菌、甲醛熏蒸、超凈臺的消毒與檢測、操作工具、器皿滅菌、操作方法等。
無菌操作原則:
1)在執行無菌操作時,必須明確物品的無菌區和非無菌區,接種時必須穿工作服、戴工作帽,應在進無菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球將手擦干凈;
2)在操作前20~30分鐘要先啟動超凈臺和紫外燈,進行接種所用的吸管、平皿及培養基等必須經消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼3次后使用。嚴禁用手直接拿無菌物品,如瓶塞等,而必須用消毒的鉗、鑷子等;
3)從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時,吸管尖不能觸及試管或平皿邊;
4)接種樣品、轉種細菌必須在酒精燈前操作,接種細菌或樣品時,吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒;
5)接種環或接種針在接種細菌前應經火焰燒灼全部金屬絲,必須時還要燒到環和針與桿的連接處;
6)吸管吸取菌液或樣品時,應用相應的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。傾倒平板應在超凈臺內操作,并且在開啟和加蓋瓶塞時需反復用酒精燈燒。
對于任何無菌技術,都應遵循一些一般規則:
1.關閉門窗以減少氣流并防止突然移動,否則可能會干擾空氣。
2.在消毒的表面上進行轉移。推薦使用乙醇消毒,因為其作用迅速。如果工作臺表面難以清潔,請用一塊容易消毒的堅硬材料覆蓋工作臺。
3.僅在所有設備和材料都在可及范圍內時,才開始操作。
4.盡快完成所有操作,但不要著急。
5.船只**在**短的時間內打開。
6.當容器打開時,所有工作都**在本生燈附近進行,所有燃燒器的火焰都是向上抽吸的。
7.在打開試管或瓶子時,**立即通過燃燒(請參閱下文)進行加熱,使容器保持在盡可能接近水平的位置,以使空氣從容器中向外排出。
8.在進行皮氏培養皿操作時,應將無菌內表面暴露在空氣中。
9.不得觸摸將要移入培養物或無菌容器的無菌移液器零件,或使其與其他非無菌表面接觸,例如衣物,工作區域表面或瓶子/試管的外部。
10.與微生物接觸的所有物品在每次暴露之前和之后都**進行消毒。這可以由技術團隊在完成一項實際工作后進行準備和清理(例如,對于要使用的玻璃器皿),也可以由工作人員在進行實際工作期間進行(例如,對火爐進行燃燒)。線環)。